Le tramway, au départ de Villeneuve, emprunte l’avenue Gabriel Péri puis bifurque pour rejoindre l’île Piot après avoir franchi le pont du Royaume. Une station est proposée sur l’île Piot où le parking existant pourra servir de parc relais pour le tramway et de pôle d’échanges. Le tramway poursuit en direction du centre-ville en franchissant le pont Daladier, avant d’emprunter les boulevards qui longent les remparts. Parmi les stations proposées sur cette partie, trois pourraient s’organiser en pôles d’échanges afin d’optimiser les correspondances bus-tram (train) : Porte de l’Oulle, Avignon-Gare et Saint-Lazare.
Enfin, vers le Pontet, le tracé préférentiel envisage une liaison de proximité directe et rapide par la Route de Lyon, au profit du développement urbain du quartier Jardin Neuf au nord de la route de Lyon et de la commune du Pontet. Puis le tracé rejoint la gare du Pontet (arrêt des lignes TER Orange / Avignon et Carpentras / Avignon) par l’avenue Théophile Delorme. Ce terminus pourrait devenir un pôle d’échanges multimodal (train / tramway / bus) intégrant un parc relais.